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        生物發(fā)光
        發(fā)布日期:2025-12-17 16:56:13


        生物發(fā)光


        一般來說,由活體生物體內(nèi)的熒光素酶催化底物熒光素氧化,并將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能,且這個(gè)過程需要ATP(三磷酸腺苷)的參與,這個(gè)不需要外界光源參與的過程被稱為生物發(fā)光。


        (螢火蟲)                                                 (海腎)
        這個(gè)發(fā)現(xiàn)過程恰恰是科學(xué)對(duì)世界認(rèn)知的一次實(shí)證,當(dāng)時(shí)科學(xué)家為了弄清楚螢火蟲的發(fā)光原理,在20世紀(jì)40年代左右,其原理終于被揭曉??茖W(xué)家在螢火蟲體內(nèi)提取出了熒光素酶(催化酶)和熒光素(底物)兩種關(guān)鍵物質(zhì),并闡述了整個(gè)過程,發(fā)光機(jī)制被破譯,即熒光素 + ATP + O? → 氧化熒光素 + CO? + 光。
        隨后,其他科學(xué)家成功解析了螢火蟲熒光素的完整化學(xué)結(jié)構(gòu),并實(shí)現(xiàn)了人工合成,這使得它能夠作為商業(yè)試劑被廣泛使用,最常見的場(chǎng)景如下。
        報(bào)告基因檢測(cè): 將熒光素酶基因連接到目標(biāo)基因的啟動(dòng)子后面,一旦目標(biāo)基因被激活表達(dá),就會(huì)同時(shí)表達(dá)熒光素酶,加入底物后就會(huì)發(fā)光,發(fā)光強(qiáng)度直接反映目標(biāo)基因的活躍程度。在此應(yīng)用中,螢火蟲和海腎發(fā)光體系無疑是當(dāng)之無愧的代表,兩者的組合成就了一段試劑“佳話”--雙報(bào)告基因系統(tǒng)。
        體內(nèi)成像: 將表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞或微生物植入小鼠體內(nèi),通過注射底物熒光素,可以用高靈敏度相機(jī)觀測(cè)腫瘤生長、感染進(jìn)程、基因表達(dá)位置等,是一種強(qiáng)大的非侵入性活體成像技術(shù),可以無創(chuàng)、實(shí)時(shí)地在活體動(dòng)物體內(nèi)追蹤腫瘤轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)、基因表達(dá)、觀察感染過程、評(píng)估藥物效果。
        ATP含量檢測(cè): 由于反應(yīng)需要ATP,發(fā)光強(qiáng)度與ATP濃度成正比,因此可用于檢測(cè)細(xì)胞活性、微生物數(shù)量(如細(xì)菌污染檢測(cè))。
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