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        化學(xué)發(fā)光
        發(fā)布日期:2025-12-17 16:58:23


        化學(xué)發(fā)光



        所謂化學(xué)發(fā)光,專業(yè)解釋為兩種或多種化學(xué)物質(zhì)發(fā)生氧化還原反應(yīng),產(chǎn)生一個(gè)處于激發(fā)態(tài)的中間體,當(dāng)這個(gè)中間體回到基態(tài)時(shí)釋放出光子,其發(fā)光能量來自于化學(xué)反應(yīng)中釋放的能量,即化學(xué)能。這個(gè)過程分為兩種,直接發(fā)光和間接發(fā)光。

        直接發(fā)光是最簡單的化學(xué)發(fā)光反應(yīng),其標(biāo)記物(如吖啶酯)自身具有發(fā)光基團(tuán),在免疫反應(yīng)后,僅需加入堿性溶液和過氧化氫等氧化劑,即可直接發(fā)生發(fā)光反應(yīng),無需催化劑。
        (直接化學(xué)發(fā)光)

        間接發(fā)光其標(biāo)記物是酶(如ALP或HRP)。免疫反應(yīng)后,加入相應(yīng)的發(fā)光底物(如ALP對應(yīng)AMPPD,HRP對應(yīng)魯米諾),酶催化底物反應(yīng)并產(chǎn)生光信號,又稱酶促化學(xué)發(fā)光。
        (酶促化學(xué)發(fā)光)

        在化學(xué)發(fā)光體系中,目前常用的直接發(fā)光標(biāo)記物有魯米諾類和吖啶酯類,間接發(fā)光有辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP),發(fā)光底物以魯米諾、AMPPD為代表。

        此應(yīng)用中最為普及的當(dāng)屬與免疫相結(jié)合的分析檢測手段,行業(yè)內(nèi)稱為化學(xué)發(fā)光免疫分析方法(CLIA),另外在科研實(shí)驗(yàn)里,蛋白電泳轉(zhuǎn)印后通過ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒檢測則是最為常用的。
        Western Blot(蛋白免疫印跡): 最經(jīng)典的應(yīng)用,用HRP標(biāo)記的二抗與目標(biāo)蛋白結(jié)合,加入化學(xué)發(fā)光底物后,HRP催化底物發(fā)光,通過曝光或化學(xué)發(fā)光成像來檢測蛋白條帶。

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